Michael Dorsey, een getalenteerd off-Broadway-acteur, zit al een tijdje zonder werk. Als actrice Dorothy Michaels schrijft hij zich tenslotte in voor een auditie, en wordt prompt geëngageerd voor de rol van Emily in een populaire tv-reeks. De realistische uitspraken waarmee Dorothy, alias Tootsie, uitpakt op de set en daarbuiten, bezorgen haar een stevige reputatie.